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一种重组Atropos®T4溶菌酶的纯化制备方法 

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申请/专利权人:西安麦博泰克生物科技有限公司

摘要:本申请提供了一种重组溶菌酶的纯化制备方法,包括:构建T4溶菌酶载体pET‑28a+并制备质粒,转化质粒为感受态大肠杆菌,获取转化成功的大肠杆菌单克隆,诱导转化成功的大肠杆菌单克隆收获待处理湿菌,获得可溶表达的T4溶菌酶;对可溶表达的T4溶菌酶放大发酵,完成发酵后,离心收获预处理湿菌;对预处理湿菌进行高压匀浆裂解、离心,获得上清液;对上清液进行纯化,获得纯度高达95%的重组溶菌酶。本申请提供的重组溶菌酶可在‑20℃长期保存。可广泛应用于饲料、食品和医药等行业,具有良好的商业应用前景;同时本发明公开了溶菌酶在裂解大肠杆菌方面的应用,获得一种一步法高效温和裂解大肠杆菌的裂解液,无需机械破碎,通常可在10‑30分钟内完成样品裂解。

主权项:1.一种重组T4溶菌酶的纯化制备方法,其特征在于,包括:构建T4溶菌酶载体pET-28a+并制备质粒,转化质粒为感受态大肠杆菌,获取转化成功的大肠杆菌单克隆,诱导转化成功的大肠杆菌单克隆收获待处理湿菌;对所述待处理湿菌进行进一步诱导,获得可溶表达的T4溶菌酶;对可溶表达的T4溶菌酶放大发酵,离心收获预处理湿菌;对预处理湿菌进行高压匀浆裂解、离心,获得上清液;对上清液进行纯化,获得纯度高达95%的重组T4溶菌酶。

全文数据:

权利要求:

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