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申请/专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
摘要：本发明公开了一对靶向对虾急性肝胰腺坏死病致病因子的驼源纳米抗体及其制备方法，该纳米抗体氨基酸序列为选自SEQIDNO.8~20任意一种氨基酸序列，为可用于副溶血性弧菌的pirA、pirB抗原蛋白检测。该纳米抗体的制备或筛选方法包括以下步骤：A：pirA、pirB抗原蛋白的表达与纯化；B：驼源天然文库的构建；C：驼源天然文库进行M13K07辅助噬菌体救援、纯化得到噬菌体文库；D：抗pirA、抗pirB抗原蛋白噬菌体文库淘选；E：phage‑ELISA鉴定并测序，序列比对具有不同CDR3区序列的pirA、pirB纳米抗体。本发明提供的纳米抗体能够特异性识别副溶血性弧菌，可以检测水产养殖动物、养殖水体是否感染副溶血性弧菌，养殖饲料是否遭受副溶血性弧菌污染等，实现副溶血性弧菌的快速检测。
主权项：1.一种用于检测副溶血性弧菌的纳米抗体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤A：pirA抗原蛋白或pirB抗原蛋白的表达，包括：构建pirA重组质粒或pirB重组质粒，将构建好的所述pirA重组质粒或所述pirB重组质粒通过原核生物诱导表达并纯化，得到所述pirA抗原蛋白或所述pirB抗原蛋白；步骤B：驼源天然文库的构建；步骤C：对构建好的驼源天然文库进行辅助噬菌体救援并纯化，得到噬菌体文库并检测其效价；步骤D：对所述噬菌体文库进行二轮、三轮、四轮或五轮淘选，得到最终洗脱液；步骤E：利用所述最终洗脱液进行上清液的制备以进行phage-ELISA鉴定并测序，根据测序结果筛选具有不同CDR3区序列的pirA纳米抗体或pirB纳米抗体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国海洋大学三亚海洋研究院 一对靶向对虾急性肝胰腺坏死病致病因子的驼源纳米抗体及其制备方法
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