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申请/专利权人：南京医科大学
摘要：本发明提供了一种基于凝集素包被磁珠的微量糖基化肽段富集方法。该方法首先通过非共价的结合方式将凝集素包被于磁珠表面，然后使用包被了凝集素的磁珠来特异性富集糖基化肽段。本发明主要改进了基于凝集素富集糖基化肽段的富集方法，整个实验过程均在一个反应管中进行，操作简便，有助于减少样品损失。这一方法特别适用于微量样品N‑糖基化肽段的富集，结合高分辨质谱仪，可以基于磁珠特性实现对微量样品中N‑糖基化肽段的自动化大规模鉴定。因此，本发明提供了一种通用性强、灵敏度高的N‑糖基化肽段富集方法，具有广阔的应用前景。
主权项：1.一种基于凝集素包被磁珠的包被的微量糖基化肽段富集方法，用于糖基化蛋白质组学分析，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1在中性pH的有机溶液中，磁珠捕获凝集素并将其以非共价结合的方式包被在磁珠表面；2洗涤未与磁珠结合的凝集素；3肽段样品与包被凝集素的磁珠孵育，从而富集糖基化肽段；4洗涤未与磁珠结合的非糖肽后，加入N-糖酰胺酶F将N-糖基化肽段从磁珠上释放，在此过程中，糖基化修饰位点天冬酰胺会转化为天冬氨酸，发生质量偏移；5肽段在酸性条件下洗脱，进行质谱检测；6质谱数据检索时，添加脱酰胺化的可变修饰，得到N-糖基化蛋白质组学数据。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京医科大学 一种基于凝集素包被磁珠的微量糖基化肽段富集方法
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