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申请/专利权人：广州市名卉景观科技发展有限公司;广州建筑股份有限公司;广州市建筑集团有限公司

摘要：本发明提供了一种粉佳人蝴蝶兰花梗芽的消毒方法，包括以下步骤：选梗芽完整的蝴蝶兰植株，保留带有花梗芽的花梗部分；用酒精棉由下而上擦拭1次；并根据老嫩程度进行分级，分成老花梗和嫩花梗两种；后配制两种消毒液，将老花梗和嫩花梗分别放入两个空的无菌瓶中，分别消毒后的老花梗和嫩花梗花梗芽上的苞片，将剥除苞片后的花梗芽浸泡在升汞溶液毒液中，后倒出消毒液；然后将花梗芽接种到装有花梗芽诱导培养基的培养瓶中；将接种好的培养瓶放入培养室中进行花梗芽的诱导。本发明花梗芽污染率为5‑10％，花梗芽的成活率为90‑95％。

主权项：1.一种粉佳人蝴蝶兰花梗芽的消毒方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）花梗选取：选取开花一朵、无病毒无病害表现、花序排列正常、花梗芽完整的蝴蝶兰植株，用75wt%酒精消毒后的工具截取整枝花梗，并剪去上面花序，只保留带有花梗芽的花梗部分；（2）花梗芽分级：在无菌操作台上将花梗芽分别剪下，并根据老嫩程度进行分级，分成老花梗和嫩花梗两种；将花梗剪成约1-2cm长带腋芽的切断；（3）花梗初消毒：将剪好的切断用75wt％的酒精棉由下而上擦拭后投入1wt%的双氧水中，1wt%的双氧水中加2滴表面活性剂，置于摇床上振荡2-3个小时后，用无菌水洗涤3次后，再用75wt%酒精漂洗1分钟，再用无菌水漂洗3次；（4）消毒液准备：分别配制两种消毒液，第一种消毒液由二氧化氯加无菌水组成，二氧化氯的质量分数为0.1-0.2%；第二种消毒液由升汞溶液加无菌水组成，升汞溶液的质量分数为0.1-0.2%；两种消毒液配制好后都分别加入1-3滴表面活性剂；（5）第一次消毒：将老花梗和嫩花梗分别放入两个空的无菌瓶中，可选择用第一种消毒液或第二种消毒液在摇床上进行消毒灭菌，消毒灭菌结束后用无菌水漂洗2-3遍待转入袋；（6）剥除苞片：将灭菌好的节段放在无菌牛皮纸上晾干水分，剥去消毒后的老花梗和嫩花梗花梗芽上的苞片，剥除时不得伤到花梗和花梗芽；（7）接种：切除节段上部创面以下4-5mm的药蚀部分和下部创面以上6-10mm的药蚀部分，切为45°角，剥除苞片，然后以每袋一节段的标准将外植体接种于诱导培养基上进行诱导培养；（8）培养：将接种好的培养瓶放入培养室中进行花梗芽的诱导培养，培养50-60天长成完整植株即可。

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