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申请/专利权人:上海渤因生物科技有限公司
摘要:本申请涉及一种利用昆虫细胞‑‑杆状病毒体系制备一种线性双链无末端的DNAneDNA表达载体,所述neDNA载体含有AAV反向末端重复序列ITRs和一种基因表达盒。本申请的昆虫细胞‑‑杆状病毒体系制备neDNA的产量高,产率平均有2‑3倍提升。相比于其他Bac‑rep,经过3次连续杆状病毒传代后,Rep蛋白Rep78的表达稳定性更好。
主权项:1.分离的核酸分子,其依次包含第一polyA、编码Rep78蛋白的核苷酸序列、第一启动子、第二启动子、编码Rep52的蛋白核苷酸序列和第二polyA,其中所述第一启动子为编码Rep78蛋白的核苷酸序列和第一polyA的转录启动子,所述第二启动子为编码Rep52蛋白的核苷酸序列和第二polyA的转录启动子,其中所述编码Rep52蛋白的核苷酸序列和或所述编码Rep78蛋白的核苷酸序列的序列经过密码子优化以避免同源重组,所述第一启动子为p10启动子,所述第二启动子为polh启动子,所述编码Rep78蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:11所示,所述编码Rep52蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:12所示。
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百度查询: 上海渤因生物科技有限公司 杆状病毒载体及其用途
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