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一种CSF1R相关性疾病小鼠模型的构建方法 

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申请/专利权人:上海市第六人民医院

摘要:本发明涉及一种CSF1R相关性疾病小鼠模型的构建方法,主要通过CRISPRCas9技术,导入C57Bl6J小鼠的Csf1r基因c.2375TC杂合突变而得。本发明的小鼠模型成年后出现运动、认知、精神障碍的行为学改变,与人类患者临床特征相似;病理上可见小胶质细胞数量显著减少,失去稳态,同时伴弥漫性脱髓鞘、轴索球样变、点状钙化,与人类患者病理表型高度相似,因此本发明的小鼠模型可以准确表征CRD患者临床及病理特点。

主权项:1.一种CSF1R相关性疾病小鼠模型的构建方法,包括如下步骤:1构建靶向小鼠Csf1r基因第18号外显子第2375号碱基的gRNA1与gRNA2;2构建含突变位点的donoroligo;3将所述gRNA1、gRNA2、donoroligo和Cas9mRNA共同注射到C57Bl6J小鼠受精卵中,获得F0代小鼠;4筛选F0代阳性小鼠与野生型C57Bl6J小鼠进行交配,获得PCR和测序鉴定阳性的F1代杂合子小鼠;5选择来自同一只F0代小鼠,敲入位点一致的F1代小鼠,达到性成熟后进行同胞交配,获得F2代小鼠;对获得的F2代小鼠进行PCR和测序鉴定,其中获得的杂合子小鼠为CSF1R相关性疾病小鼠模型。

全文数据:

权利要求:

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