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CRISPR/case9系统基因编辑构建脑出血性脑水肿动物模型 

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申请/专利权人:广州市花都区人民医院

摘要:本发明公开了应用多重创新技术联合CRISPRcase9系统基因编辑构建脑出血性脑水肿动物模型,属于系统基因编辑领域构建,包扩以下步骤:S1、构建Cas9体外表达载体;S2、原核Cas9蛋白的诱导表达和纯化;S3、sgRNA的合成;S4、Cas9蛋白体外功能检测;S5、利用Cas9重组蛋白构建点突变C57BL6小鼠;S6、实验动物分组;S7、构建脑出血性脑水肿动物模型;应用多重创新技术联合CRISPRcase9系统基因编辑构建脑出血性脑水肿C57BL6鼠动物模型的基础上,利用甲基化抑制剂5‑Aza‑dC研究胶质细胞TGFβ1基因启动子去甲基化对脑出血性脑水肿的影响和作用,为阐明脑出血性脑水肿发生的分子机制提供新的靶点和研究思路。

主权项:1.CRISPRcase9系统基因编辑构建脑出血性脑水肿动物模型,其特征在于,包括如下步骤:S1、构建Cas9体外表达载体;S2、原核Cas9蛋白的诱导表达和纯化;S3、sgRNA的合成;S4、Cas9蛋白体外功能检测;S5、利用Cas9重组蛋白构建点突变C57BL6小鼠;S6、实验动物分组;S7、构建脑出血性脑水肿动物模型。

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权利要求:

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