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一种用于数字PCR检测的血液微生物DNA提取方法 

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申请/专利权人:领航基因科技(杭州)有限公司

摘要:本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种用于数字PCR检测的血液微生物DNA提取方法。本发明提供了试剂盒、血液样本中微生物核酸的提取方法,通过将血液样本分离血浆、血细胞,对血细胞进行裂解处理,能够去除大量的人源基因组对于病原菌核酸的检测干扰,同时可以减少提取过程中过量蛋白对于核酸纯度的影响。而优化出的裂解液配方能够有效提取血浆中游离的核酸片段以及从菌体中裂解出来的菌体DNA。通过搭配全自动核酸提取仪能够快速提取出血流感染样本中高纯度的病原微生物DNA,用于下游的数字PCR检测。

主权项:1.用于提取血液样本中微生物的核酸的试剂盒,其特征在于,包含血细胞裂解液和或裂解液;所述血细胞裂解液的pH值为6.5~8,包含:10~50mMTris-HCl缓冲液、50~500mMNH4Cl、10~100mMKHCO3、2~10mMEDTA-Na2和0.1%~2%vv聚乙二醇单辛基苯基醚;所述裂解液的pH为6~8,包含:1~4M异硫氰酸胍、2~5M盐酸胍、1%~5%ww月桂酰基肌氨酸钠、50~100mMTris-HCl缓冲液、5~20mMEDTA、0.1~1MNaCl、1%~10%wwPEG8000和10%~60%vv异丙醇。

全文数据:

权利要求:

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