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申请/专利权人：西安交通大学
摘要：本发明公开了一种基于N,N‑二甲基丙烯酰胺聚合单体膨胀显微镜的细胞内巯基蛋白成像方法，属于细胞成像技术领域。本发明首先识别反应胞内蛋白质的氨基，再以N,N‑二甲基丙烯酰胺聚合单体引发细胞内原位聚合反应，形成一个可膨胀的聚合物网络，荧光分子共价标记巯基蛋白，随后细胞在纯水条件下产生物理膨胀，各向同性地拉开分子之间的距离，通过常规宽场光学显微镜实现胞内巯基蛋白的高分辨成像分析。本发明成功克服了无法通过普通显微镜进行细胞内巯基蛋白的高分辨成像的技术问题，结合凝胶高分子物理放大技术与常规显微镜，可以实现单细胞单分子成像，整个反应过程条件温和，操作便捷，普适性较高。
主权项：1.一种基于N,N-二甲基丙烯酰胺聚合单体膨胀显微镜的细胞内巯基蛋白成像方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：对待处理的细胞内的蛋白质的氨基进行标记处理；步骤二：向步骤一处理后的细胞内加入N,N-二甲基丙烯酰胺聚合单体混合液，原位产生聚合凝胶，聚合凝胶将细胞骨架蛋白交联在一起作为细胞支撑材料；步骤三：向步骤二处理后的细胞内加入识别胞内蛋白巯基的荧光分子，并消化细胞骨架蛋白，保证细胞不散架；步骤四：对步骤三处理后的细胞进行溶胀处理，得到膨胀后的细胞，进行显微镜成像观察。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西安交通大学 一种基于N,N-二甲基丙烯酰胺聚合单体膨胀显微镜的细胞内巯基蛋白成像方法
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