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产生环状RNA的单罐法 

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申请/专利权人:北京大学

摘要:本申请提供了从编码线性RNA前体的DNA构建体产生环状RNAcircRNA的方法,其中线性RNA前体从5'端到3'端包含:3'催化性I组内含子片段、3'外显子序列、效应RNA序列、5'外显子序列和5'催化性I组内含子片段,其中该方法包括体外单罐反应。在一些实施方案中,单罐反应不包括在环化线性RNA前体之前补充含有GTP、二价金属离子如Mg2+、或DNA酶I的试剂组合物。

主权项:1.一种从编码线性RNA前体的DNA构建体产生环状RNA的方法,其中所述线性RNA前体从5'端到3'端包含:3'催化性I组内含子片段、3'外显子序列、效应RNA序列、5'外显子序列和5'催化性I组内含子片段,其中该方法包括体外单罐反应步骤,包括在允许DNA构建体转录成线性RNA前体和所述线性RNA前体环化的条件下,将DNA构建体与含有RNA聚合酶、腺苷5'-三磷酸ATP、尿苷5'-三磷酸UTP、鸟苷5'-三磷酸GTP和胞嘧啶5'-三磷酸CTP的试剂组合物相接触,所述环化包含激活3'催化性I组内含子片段和5'催化性I组内含子片段以拼接来自线性RNA前体的3'外显子序列和5'外显子序列,从而形成含有效应RNA的环化RNA。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 北京大学 产生环状RNA的单罐法

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