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一种获得狐尾藻转基因植株的方法 

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申请/专利权人:湖南新春农业生物高科技有限公司

摘要:本发明公开了一种快速高效的狐尾藻转基因的方法,包括以下步骤:(1)选择消毒的茎段为外植体,在MS+6‑BA1~2mgL+KT0.1~0.5mgL+IAA0.1~0.5mgL+NAA0.1~1mgL的琼脂固体培养基上培养,诱导出大量小丛芽;(2)茎段在农杆菌菌液中共培养3d;(3)将共培养完成后的狐尾藻茎段在筛选培养基中培养筛选抗性苗;(4)抗性苗的生根培养;(5)将步骤(4)中的抗性生根苗移栽,并进行PCR检测,筛选出转基因成功的植株。本发明由茎段直接诱导出大量小丛芽,避免了诱导愈伤再分化的过程,显著节省时间,提高快繁的效率。用菌液共培代替固体共培,更能保证农杆菌与外植体充分接触,进而提高了转化效率。

主权项:1.一种获得狐尾藻转基因植株的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)狐尾藻丛生芽的获得:选择优良的狐尾藻植株的茎段为外植体,将外植体消毒后在MS+6-BA1~2mgL+KT0.1~0.5mgL+IAA0.1~0.5mgL+NAA0.1~1mgL的琼脂固体培养基上培养20~30d,诱导出大量小丛芽并进行继代培养,得狐尾藻苗;(2)根癌农杆菌的共培:将狐尾藻苗剪成狐尾藻茎段,用根癌农杆菌菌液浸染所述的狐尾藻茎段,并将所述的狐尾藻茎段浸入根癌农杆菌菌液中进行共培养;(3)抗性芽的筛选:将共培养完成后的狐尾藻茎段接种到MS+6-BA1~2mgL+KT0.1~0.5mgL+IAA0.1~0.5mgL+NAA0.1~1mgL+500mgL头孢霉素+400mgL羧苄青霉素+50mgL潮霉素的筛选培养基中筛选出抗性苗;(4)抗性苗的生根培养:将经步骤(3)筛选出的抗性苗接种到MS+NAA0.1~1.5mgL+IAA0.1~1mgL的琼脂固体培养基中生根培养,得到抗性生根苗;(5)将步骤(4)所得的抗性生根苗移栽至温室或大田并进行检测,筛选出转基因成功的植株。

全文数据:

权利要求:

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