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一种类反式切割活性的CRISPR/Cas9系统的试剂盒及其多元靶标检测方法和应用 

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申请/专利权人:湖南师范大学

摘要:本发明属于核酸检测技术领域,公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统类反式切割活性实现多元靶标实时荧光检测的试剂盒,包含:靶标对应的gRNA扩增引物、Cas9蛋白、靶标dsDNA、PA、PB、含RNA腺嘌呤碱基的ssDNA报告探针和含不同金属离子的缓冲溶液。通过CRISPR‑Cas9系统和多组分酶进行联用,利用Cas9系统对核酸靶标的解螺旋能力来产生单链以促发多组分折叠形成具有催化中心的二级结构,进而对含RNA碱基的报告探针进行切割,产生荧光信号。同时,通过与不同种类的多组分酶的联用,可以实现多元核酸靶标的同时检测。本发明还公开了试剂盒的检测方法和在制备隐球菌和结核杆菌双通道实时检测产品中的应用。

主权项:1.一种类反式切割活性的CRISPRCas9系统的试剂盒,其特征在于,其组分包含:靶标对应的gRNA扩增引物、Cas9或dCas9蛋白、靶标dsDNA、PartzymeA、PartzymeB、含RNA腺嘌呤碱基的ssDNA报告探针和含金属离子的缓冲溶液。

全文数据:

权利要求:

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