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基于crRNA间隔区裂分进行单核苷酸多态性识别的方法及应用 

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申请/专利权人:湖南师范大学

摘要:本发明公开了一种基于crRNA间隔区裂分进行单核苷酸多态性识别的方法及应用,通过将与靶标碱基互补配对的crRNA间隔区分裂获得识别探针,当识别探针与目标序列完全互补配对时,激活Cas12a蛋白,产生显著荧光信号;当目标序列中存在与分裂式间隔区错配的碱基时,分裂的crRNA间隔区难以与不完全匹配序列组装,Cas12系统不被激活,不产生荧光信号。本发明的方法增强CRISPRCas12a对单碱基错配的高特异性识别能力,使得SNP的检测不受错配碱基位置的限制,并在低突变丰度中仍展示高分辨度,用于制备单核苷酸错配的检测试剂盒,以满足针对临床样品的实际检测要求。

主权项:1.一种基于crRNA间隔区裂分进行单核苷酸多态性识别的方法,其特征在于,通过将与靶标碱基互补配对的crRNA间隔区进行分裂获得识别探针,分裂式crRNA间隔区中,靠近5’端的识别探针为crRNA-Forward,靠近3’端的识别探针为crRNA-Backward,当所述crRNA-Forward和所述crRNA-Backward与目标序列完全互补配对时,激活Cas12a蛋白,产生显著荧光信号;当所述crRNA-Forward和所述crRNA-Backward与目标序列存在错配的碱基时,分裂的crRNA间隔区与不完全匹配序列难以组装,Cas12系统不会被激活,不产生荧光信号。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 湖南师范大学 基于crRNA间隔区裂分进行单核苷酸多态性识别的方法及应用

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