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申请/专利权人：中国农业科学院棉花研究所

摘要：本发明公开了一种基因编辑的新品种小麦苗期抗秆锈病的室内鉴定方法，属于作物病原菌接种方法的技术领域。该方法包括：（1）病原物分离和鉴定；（2）病原物繁殖和保存；（3）小麦材料的准备及播种；（4）接种体制备及接种方法；（5）小麦苗期秆锈病抗性鉴定；本发明在室内环境可控的条件下，能够对基因编辑的新品种小麦苗期进行秆锈病抗性鉴定，与田间抗病性鉴定方法相比，具有操作简单易行、表型直观可靠、鉴定周期短、结果精准可靠等优势，对基因编辑新品种小麦苗期秆锈病抗性鉴定及相关研究工作的开展具有重要意义。

主权项：1.一种基因编辑的新品种小麦苗期抗秆锈病的室内鉴定方法，其特征是，包括以下步骤：1病原物分离和鉴定：采集具有典型秆锈病病斑的小麦叶片，将秆锈病病菌孢子进行分离纯化，经形态学鉴定为PucciniagraminisPers.f.sp.triticiEriks.etHenn.，单孢子堆分离后，采用鉴别寄主法鉴定生理小种，并进行致病性鉴定。2病原物繁殖和保存：将鉴定后的小麦秆锈病菌接采用抖粉法或喷雾法种于感病小麦品种上，在气候室或光照培养箱中培养，出现典型病斑后进一步扩繁备用。3小麦材料的准备及播种：设置对基因编辑小麦、对应的受体材料及感病对照小麦品种；播种前，对基因编辑小麦、对应的受体材料及照感病小麦品种的种子进行清理，剔除瘪小、发芽、霉变及破损的种子。采用质量浓度为0.5％次氯酸钠溶液浸泡种子10s～20s，随后立即用清水冲洗多次，之后立即播种；在气候室或光照培养箱中培养，昼温20℃～25℃，夜温15℃～20℃。4接种体制备及接种方法：将繁菌苗上的秆锈病菌刮下来，即可用于抗病性接种；待受试小麦长至一叶一心后，采用抖粉法或喷雾法接种锈病菌分生孢子；接种后加盖塑料罩保湿，15℃黑暗条件下100％保湿24h后放在气候室或光照培养箱中继续培养，将小麦底部垫托盘，托盘内浇足水对小麦苗进行保湿。5小麦秆锈病苗期抗性鉴定：病情调查：病情调查：接种后12d～15d待感病对照品种充分发病后进行调查，分别调查并记载各供试材料第一片叶的病斑侵染型。侵染型分为0、；、1、2、X、Y、Z、3、4九个级别，根据统计分析结果，评估受试小麦对秆锈病的抗性。

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