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申请/专利权人：华南师范大学
摘要：本发明属于农业生物技术领域，涉及家蚕育种技术领域，具体涉及一种多食性家蚕的分子育种方法及其应用。本发明以家蚕味觉受体GR66为靶基因，通过基因编辑技术敲除该基因，改变其食性，促使其能够取食桑叶以外的非寄主植物，从而变成多食性家蚕，获得一种多食性家蚕，大大拓宽了家蚕的食谱，既有利于寻找可替代桑叶的非寄主植物来饲养家蚕，也有利于家蚕的大规模饲养，为大规模家蚕饲养提供了一种新的途径。
主权项：1.一种多食性家蚕的分子育种方法，其特征在于，通过基因编辑技术使家蚕缺失GR66基因，从而培育出多食性家蚕；所述多食性家蚕的分子育种方法具体包括以下步骤：S1、针对家蚕GR66基因设置引物，对家蚕基因组cDNA进行PCR扩增；所述引物包括上游引物和下游引物，其中上游引物和下游引物分别如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示；S2、以家蚕Gr66基因的外显区域作为靶位点合成sgRNA引物，然后通过PCR获得sgRNA的双链DNA，再体外转录合成sgRNA；所述外显区域为第4个外显区域，所述第4个外显区域如SEQIDNO：3所示，所述sgRNA引物包括上游引物和下游引物，其中上游引物和下游引物分别如SEQIDNO：4和SEQIDNO：5所示；S3、用步骤S2的sgRNA与cas9蛋白对家蚕基因组DNA进行切割，获取具有体外切割活性的sgRNA；S4、将步骤S3的sgRNA与cas9蛋白一起注入发育早期的家蚕卵内，然后将鉴定出GR66基因发生了移码突变的阳性个体与野生型个体交配，再从下代挑选发生了移码突变的阳性个体进行自交，最后从自交后代中鉴定出纯合的缺失突变体，即为多食性家蚕；所述鉴定采用PCR法，鉴定所用上游引物如SEQIDNO：7所示，下游引物如SEQIDNO：8所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华南师范大学 一种多食性家蚕的分子育种方法及其应用
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