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一种过表达rapX编码的外源FK506转运蛋白的基因工程菌、其构建方法和用途 

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申请/专利权人:浙江大学

摘要:本发明涉及一种过表达rapX编码的外源FK506转运蛋白的基因工程菌、其构建方法和用途。通过引入外源的他克莫司转运蛋白编码基因rapX,敲除代谢竞争性途径,并利用人工构建的双向强启动子元件原位替换他克莫司基因簇中tcs6和tcs7之间的启动子区域后获得的。同时,通过在发酵培养基Fm中添加6gL的L‑异亮氨酸,该菌株摇瓶发酵他克莫司发酵水平稳定在980mgL左右左右。本发明提供的菌株遗传性能稳定、发酵过程简单、发酵水平高,适合应用于他克莫司的工业化生产。

主权项:1.一种过表达rapX编码的外源FK506转运蛋白的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌筑波链霉菌(Streptomycestsukubaensis)的基因组中包含基因表达盒和人工元件,所述的基因表达盒过表达rapX编码的外源FK506转运蛋白,所述rapX的核苷酸如SEQIDNO.1所示;其中,所述人工元件是指启动子元件,所述的启动子元件由人工构建的双向强启动子原位替换了基因簇中tcs6和tcs7之间的启动子区域得到,所述人工构建的双向强启动子如SEQIDNO.5所示,利用SEQIDNO.2~SEQIDNO.4所示的核苷酸序列对基因组的同源区域替换,阻断竞争性途径,从而使工程菌基因组存在序列SEQIDNO.2~SEQIDNO.4所示的核苷酸序列。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江大学 一种过表达rapX编码的外源FK506转运蛋白的基因工程菌、其构建方法和用途

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