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申请/专利权人：康诺生物制药股份有限公司
摘要：本发明公开了一种SEC‑HPLC法测定尿激酶纯度的方法，涉及药物分析技术领域，首先采用离心和透析的方法从尿激酶溶液中提取尿激酶样品，并使用滤膜对提取的尿激酶样品进行过滤操作，设置合适的色谱条件，色谱柱长度为300mm，流速为0.5‑1.0mlmin，柱温为25‑35℃，样品盘温度为5‑15℃，检测波长为210‑220nm，进样量为5‑25ul，将制备好的尿激酶样品注入SEC‑HPLC仪中，进行色谱分析，并使用检测器收集尿激酶分子峰，通过检测器监测尿激酶的洗脱峰，并记录色谱图，收集尿激酶的多项数据，使用面积归一化法计算尿激酶的纯度，并进行重复实验，并根据实验结果，提出改进建议或优化措施。本发明选用分子排阻色谱法，并筛选出适宜的测定条件，可以准确地进行尿激酶纯度的测定，测定条件稳定。
主权项：1.一种SEC-HPLC法测定尿激酶纯度的方法，包括样品准备、流动相制备、设置色谱条件、进样分析、数据采集处理、数据计算、重复性实验和结果分析比对，其特征在于，尿激酶纯度测定方法如下：S1、首先，采用离心和透析的方法从尿激酶溶液中提取尿激酶样品，并使用滤膜对提取的尿激酶样品进行过滤操作；S2、色谱柱为二醇基键合硅胶，流动相为PH6.8磷酸盐缓冲液；S3、设置合适的色谱条件，色谱柱长度为300mm，流速为0.5-1.0mlmin，柱温为25-35℃，样品盘温度为5-15℃，检测波长为210-220nm，进样量为5-25ul；S4、将制备好的尿激酶样品注入SEC-HPLC仪中，进行色谱分析，并使用检测器收集尿激酶分子峰；S5、在色谱分析的过程中，通过检测器监测尿激酶的洗脱峰，并记录色谱图，收集尿激酶的多项数据；S6、使用面积归一化法计算尿激酶的纯度，并根据步骤S5中收集到的多项数据评估尿激酶样品的质量；S7、进行重复实验，比较多次实验结果的稳定性；S8、综合考虑比对分析所有的实验结果，评估尿激酶的纯度是否符合预期要求，并根据实验结果，提出改进建议或优化措施。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 康诺生物制药股份有限公司 一种SEC-HPLC法测定尿激酶纯度的方法
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