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一种无机盐培养基进行高密度发酵大肠杆菌的驯化方法 

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申请/专利权人:诸城市浩天药业有限公司

摘要:本发明公开了一种无机盐培养基进行高密度发酵大肠杆菌的驯化方法,涉及大肠杆菌发酵技术领域,大肠杆菌经活化、一级菌种培养、二级菌种培养和种子罐培养进行驯化,得到的种子罐菌种可以在无机盐培养基上进行发酵,发酵后得到的菌体生物量OD600值达到148左右,跟使用有机培养基发酵后得到的菌体生物量OD600值相当,菌种的发酵效果好,另外,无机盐培养基的应用大大节约了发酵成本。

主权项:1.一种无机盐培养基进行高密度发酵大肠杆菌的驯化方法,其特征在于包括以下步骤:S1:大肠杆菌菌种活化在超净工作台上用接种环从甘油管中蘸取少量菌体按三段式在平板培养基上划线,35-38℃培养12-16h,得活化菌种;S2:一级菌种培养从活化菌种中挑取单菌落到试管培养基中,35-38℃、200-250rpm培养至OD600为1.5-2,得一级菌种;S3:二级菌种培养一级菌种按0.5-1.5%vv的接种量接种到摇瓶培养基中,35-38℃、200-250rpm培养至OD600为1.5-2,得二级菌种;S4:种子罐菌种培养二级菌种按1~10%vv的接种量接种到种子罐培养基中,35-38℃、280-320rpm,通风量按照1:0.5~1.5的通气比通气,溶氧22-28%,搅拌联动进行发酵,培养至OD600为1.5-2,得种子罐菌种;S5:发酵培养按1~10%vv的接种量移种至发酵罐,初始35-38℃、180-220rpm,通风量按照1:0.5~1.5的通气比通气,溶氧22-28%,根据溶氧搅拌与通气量交替联动进行发酵,发酵至生物量不再升高下罐,得高密度发酵大肠杆菌发酵液。

全文数据:

权利要求:

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