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申请/专利权人：苏州同力生物医药有限公司

摘要：本发明涉及一种基于待测样本制备用于病原体例如新型冠状病毒COVID‑19检测目的的测试液的方法，采用裂解液对待测样本进行裂解处理以释放出样本中包含的核酸，获得包含核酸的裂解液，所述核酸包括宿主核酸，或者当所述待测样本包含病原体时，所述核酸还包含病原体核酸；将所述含有核酸的裂解液通过核酸提取装置进行提取，获得提取物，所述提取物包含宿主核酸，或者当所述待测样本包含病原体时，所述提取物中还包含病原体核酸；由所述提取物制备所述用于病毒检测目的的测试液。本发明可以提取和浓缩大体积样本中的核酸，保留病原体核酸和宿主核酸，从而可以同时检测病原体核酸和多种宿主核酸，以提高病原体检测的灵敏度以及阳性率。

主权项：1.一种基于待测样本制备用于病原体检测目的的测试液的试剂盒，其包括检测病原体及宿主核酸的引物、清洗液、样本处理液、脱氧剂、裂解液、吸附液、洗脱液、蛋白酶以及用于病原体检测目的的测试液；所述用于病原体检测目的的测试液通过如下步骤制备得到：采用裂解液对待测样本进行裂解处理以释放出样本中包含的核酸，获得包含核酸的裂解液，所述核酸包括宿主核酸，或者当所述待测样本包含病原体时，所述核酸还包含病原体核酸；将所述包含核酸的裂解液通过核酸提取装置进行提取，获得提取物，所述提取物包含宿主核酸，或者当所述待测样本包含病原体时，所述提取物中还包含病原体核酸；通过在提取开始前、提取过程中或提取结束后，在提取物所处环境中加入脱氧剂控制氧含量低于0.01～1％，以稳定所述提取物中的宿主核酸，使所述测试液中包含有所述宿主核酸；由所述提取物制备所述用于病原体检测目的的测试液；所述待测样本为唾液、尿液、鼻咽拭子、口咽拭子、支气管肺部灌洗液、脑脊液、淋巴液、腹水、羊水、腹膜透析液中的一种或多种；所述用于病原体检测目的的测试液的制备方法还包括如下步骤：A.使提取过程中所采用的裂解液和或清洗液中包含三2-羧乙基膦盐酸盐；B.控制所述待测样本的体积为1～40mL；C.采用封闭式核酸提取装置进行所述提取；所述的宿主核酸为mRNA；所述的检测宿主核酸的引物包括针对IP-10的引物对、针对IL6的引物对、针对IL2的引物对、针对IL17A的引物对、针对IL13的引物对、针对TNF的引物对、针对MCP1的引物对、针对HO1的引物对、针对IFNγ的引物对、针对vWF的引物对、针对SELP的引物对、针对THBD的引物对、针对SAA的引物对、针对CRP的引物对中的一种或多种；所述的针对IP10的引物对的序列如SEQIDNO.1～8所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对IL6的引物对的序列如SEQIDNO.9～24所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对IL2的引物对的序列如SEQIDNO.37～46所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对IL17A的引物对的序列如SEQIDNO.47～50所示的引物对中的一对或全部；所述的针对IL13的引物对的序列如SEQIDNO.51～54所示的引物对中的一对或全部；所述的针对TNF的引物对的序列如SEQIDNO.55～64所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对MCP1的引物对的序列如SEQIDNO.65～68所示的引物对中的一对或全部；所述的针对HO1的引物对的序列如SEQIDNO.69～80所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对IFNγ的引物对的序列如SEQIDNO.81～84所示的引物对中的一对或全部；所述的针对vWF的引物对的序列如SEQIDNO.85～90所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对SELP的引物对的序列如SEQIDNO.91～96所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对THBD的引物对的序列如SEQIDNO.97～102所示的引物对中的一对、多对或全部；所述的针对SAA的引物对的序列如SEQIDNO.103～106所示的引物对中的一对或全部；所述的针对CRP的引物对的序列如SEQIDNO.107～112所示的引物对中的一对、多对或全部。

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