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申请/专利权人：正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司;正大天晴药业集团股份有限公司
申请日：2019-11-28
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN111269316B
主分类号：C07K16/32
分类号：C07K16/32;C07K16/28;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/18
优先权：["20181204 CN 2018114743169"]
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.28#授权;2021.12.21#实质审查的生效;2020.06.12#公开
摘要：本方法涉及抗HER2单克隆抗体的纯化方法，包括亲和层析，病毒灭活，深层过滤，阴离子交换层析，阳离子交换层析等步骤。
主权项：1.一种纯化蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：a亲和层析；b病毒灭活；c深层过滤；d阴离子交换层析；e阳离子交换层析；所述步骤依次进行；其中，所述亲和层析包括：1先用平衡缓冲液冲洗亲和层析柱，然后开始上样，所述平衡缓冲液为pH7.0的含80mM氯化钠的50mM磷酸钠缓冲液，2用平衡缓冲液进行第一次淋洗，所述平衡缓冲液为pH7.0的含80mM氯化钠的50mM磷酸钠缓冲液，3用淋洗缓冲液进行第二次淋洗，所述淋洗缓冲液为pH4.5的含1M氯化钠的50mM乙酸钠缓冲液，4用洗涤缓冲液进行第三次淋洗，所述洗涤缓冲液为pH7.0的含80mM氯化钠的50mM磷酸钠缓冲液，5然后用洗脱缓冲液进行洗脱，所述洗脱缓冲液为pH3.4的含20mM氯化钠的50mM柠檬酸钠缓冲液；所述阳离子交换层析包括：1先用平衡缓冲液对阳离子层析柱进行冲洗，然后上样，所述平衡缓冲液为pH5.0的含45mM氯化钠的20mM柠檬酸钠缓冲液，2用第一淋洗缓冲液进行第一次淋洗，所述第一淋洗缓冲液为pH5.0的含45mM氯化钠的20mM柠檬酸钠缓冲液，3用第二淋洗缓冲液进行第二次淋洗，所述第二淋洗缓冲液为pH7.6的20mM磷酸钾缓冲液，4用第三淋洗缓冲液进行第三次淋洗，所述第三淋洗缓冲液为pH5.5的20mM磷酸钾缓冲液，5用第四淋洗缓冲液进行第四次淋洗，所述第四淋洗缓冲液为pH5.5的20mM柠檬酸钠缓冲液，6然后用洗脱缓冲液进行洗脱，所述洗脱缓冲液为pH5.5的含93mM氯化钠的20mM柠檬酸钠缓冲液；所述蛋白为曲妥珠单抗。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司;正大天晴药业集团股份有限公司 抗HER2单克隆抗体的纯化方法
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