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申请/专利权人：北京化工大学

摘要：本发明提供了葡萄糖触发的活性氧响应注射型复合水凝胶的制备方法。该制备方法包括：制备获得主链具有苯硼酸的透明质酸‑氨基苯硼酸衍生物HA‑g‑PBA和丙烯酸基修饰的葡萄糖氧化酶衍生物GOx‑AC；利用巯基苯硼酸的巯基与GOx‑AC的丙烯酸酯基进行迈克尔加成反应，制备获得带有苯硼酸葡萄糖氧化酶衍生物GOx‑g‑PBA；通过GOx‑g‑PBA的羟基与聚乙烯醇的羟基形成硼酸酯动态共价键，制备获得修饰有葡萄糖氧化酶的聚乙烯醇衍生物PVA‑g‑GOx；将HA‑g‑PBA与PVA‑g‑GOx按预设比例混合后通过形成硼酸酯动态共价键，制备获得葡萄糖触发的活性氧响应注射型复合水凝胶。该制备方法简单且应用前景良好，能通过葡萄糖和活性氧双重响应调控降解周期。

主权项：1.葡萄糖触发的活性氧响应注射型复合水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1）透明质酸-氨基苯硼酸衍生物HA-g-PBA的制备将分子量40Kda的2gHA溶于800mL的超纯水中，然后加入690mg4-氨基苯硼酸溶于100mLDMSO溶液，再加入1530mg1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳二酰亚胺盐酸盐，并通过盐酸调整溶液pH到4.5-5.0，再加入920mgN-羟基琥珀酰亚胺，反应6小时；产物HA-g-PBA溶液使用截留分子量8-10KDa透析袋，经过透析提纯后冻干保存；步骤2）修饰有葡萄糖氧化酶的聚乙烯醇衍生物的制备取50mg葡萄糖氧化酶溶解在5mL，pH=7.4-8.0，150mMPBS缓冲溶液中，另取10μLN-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺10%（wv）DMSO溶液，滴加到葡萄糖氧化酶溶液中，室温搅拌4小时，产物GOx-AC在4℃下使用截留分子量3500透析袋透析提纯；再取20μL4-巯基苯硼酸1%（wv）DMSO溶液，滴加到上步提纯后的溶液中，37℃搅拌2小时，产物GOx-g-MPBA在4℃下使用截留分子量3500透析袋透析提纯；取10mL采用pH=7.4-8.0，150mMPBS溶解的聚乙烯醇10%（wv）缓冲溶液，稀释2倍，再将透析提纯后溶液滴加到聚乙烯醇溶液中，室温搅拌12小时，使用截留分子量200KDa透析袋透析提纯后，冻干得到产物PVA-g-GOx；3）水凝胶的制备将步骤1）中所制HA-g-PBA18mg溶解于100μL150mM的缓冲液，其中缓冲液选择为磷酸缓冲盐溶液PBS，并且，该PBS缓冲液的pH值为7.4-8；步骤2）中所制PVA-g-GOx10mg溶解于100μL150mMPBS缓冲液中，并且，该PBS缓冲液的pH值为7.4-8；待两相完全溶解后等体积混合得到水凝胶前体溶液，再将水凝胶前体溶液在37℃烘箱交联固化40-60min形成葡萄糖触发的活性氧响应注射型复合水凝胶。

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