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申请/专利权人：正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司;正大天晴药业集团股份有限公司
申请日：2019-10-22
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN111153993B
主分类号：C07K16/24
分类号：C07K16/24;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/18
优先权：["20181107 CN 2018113204912"]
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.28#授权;2021.09.28#实质审查的生效;2020.05.15#公开
摘要：本发明涉及抗TNF‑α单克隆抗体的制备方法，包括亲和层析，病毒灭活，深层过滤，阴离子交换层析，阳离子交换层析等步骤。本发明通过在亲和层析淋洗过程中增加缓冲液电导率，以及在阳离子交换层析淋洗过程中改变缓冲液的pH，提高了产品的纯度，同时得到了较高的总回收率。
主权项：1.一种纯化蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：a亲和层析，所述亲和层析的淋洗步骤包括先用pH7.4的含150mM氯化钠的50mMTris-乙酸缓冲液进行淋洗，再用pH5.0的含1M氯化钠的50mM乙酸钠-乙酸缓冲液进行淋洗，最后用pH5.0的50mM的乙酸钠-乙酸缓冲液进行淋洗，淋洗后用pH3.5的50mM乙酸钠-乙酸缓冲液进行洗脱；b调节亲和层析洗脱液的pH值至3.0-4.0，进行病毒灭活；c深层过滤；d阴离子交换层析，所述阴离子交换层析的平衡液为pH5.7的50mM乙酸钠-乙酸缓冲液；e阳离子交换层析，所述阳离子交换层析的淋洗步骤包括先用第一淋洗缓冲液进行第一次淋洗，再用第二淋洗缓冲液进行第二次淋洗，最后用第三淋洗缓冲液进行第三次淋洗，其中，所述第一淋洗缓冲液为pH5.5的50mM乙酸钠-乙酸缓冲液，所述第二淋洗缓冲液为pH7.9的20mM磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液，所述第三淋洗缓冲液为pH5.0的50mM乙酸钠-乙酸缓冲液，淋洗后用pH5.0的含0.3M氯化钠的50mM乙酸钠-乙酸缓冲液进行洗脱；所述蛋白为阿达木单抗。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司;正大天晴药业集团股份有限公司 抗TNF-α单克隆抗体的制备方法
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2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
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