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申请/专利权人：集美大学
申请日：2024-03-18
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN118256579A
主分类号：C12P21/00
分类号：C12P21/00;C07K1/16;C07K7/06;C07K7/08
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.28#公开
摘要：本发明公开了一种三文鱼皮DPP‑IV抑制肽的制备方法。本方法以三文鱼皮为原料，经预处理后，利用枯草芽孢杆菌发酵三文鱼皮，得到的发酵液经过离心、凝胶过滤色谱和半制备液相色谱分离，收集活性高的组分即为本发明制得的DPP‑IV抑制肽。本发明使用枯草芽孢杆菌发酵技术简单可行，生产成本低，设备易得，并且能最大程度地释放鱼皮中的活性成分，制得的多肽具有抑制DPP‑IV活性的功效。
主权项：1.一种三文鱼皮DPP-IV抑制肽的制备方法，包括如下步骤：S1：三文鱼皮去鳞和碎肉，加入4-7倍体积的浓度为0.1％-0.3％的NaOH溶液，浸泡两小时；然后用4-7倍体积的浓度为0.1％-0.3％的H2SO4，浸泡两小时；最后用4-7倍体积的浓度为0.5％-2.0％的C6H8O7溶液，浸泡两小时；每次更换溶剂前用清水清洗至pH值为7.0；S2：将步骤S1处理好的鱼皮置于搅拌机，得到鱼皮碎块，加入1-3倍体积的温度为40-50℃的温水搅拌8-12小时，离心收集上清液；S3：将步骤S2得到的上清液在121℃下灭菌20min，冷却至室温；S4：在步骤S3得到的上清液中按10％的接种比例加入活化后的枯草芽孢杆菌种子液；S5：将步骤S4得到的混合液置于37℃、pH6-8条件下，以180rpm的速度发酵35-52h后获得发酵液；S6：将步骤S5得到的发酵液灭酶后进行离心，取上清液；S7：将步骤S6得到的上清液进行减压浓缩至溶液体积为原溶液体积的14；S8：将步骤S7中的溶液添加至SephadexG-25凝胶层析柱中，收集洗脱峰测定其对DPP-IV酶的抑制性，选择抑制性最高的组分进行下一步分离；S9：采用半制备型反向高效液相色谱对步骤S8的组分进一步纯化，收集28-30分钟的洗脱峰，即为具有DPP-IV抑制性的多肽。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 集美大学 一种三文鱼皮DPP-IV抑制肽的制备方法
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