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消除PCR荧光基线期波动的方法 

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申请/专利权人:安图实验仪器(郑州)有限公司

摘要:本发明公开了一种消除PCR荧光基线期波动的方法,包含下述步骤:1,在实时荧光定量PCR反应中,采集荧光信号数据集,数据集包含多个数据点;将每个所述数据点与设定的顺序号一一对应,使得每一个数据点分别对应平面坐标系中的一个坐标点(x,y),其中,x值表示实时荧光PCR循环数,y值表示测得的荧光信号值,所述荧光信号值包含发光值、吸光度;2,通过使用数据拟合方法应用于函数模型,计算求出函数模型中的参数值a,b,c,d,e;3,对所述函数表达式进行处理,求出荧光信号值达到指数扩增时的循环周期数Ct值。本发明解决了聚合酶链式反应测光过程中荧光波动引起的数据不准确,为后续计算提供了准确、科学数据。

主权项:1.一种消除PCR荧光基线期波动的方法,其特征在于:包含下述步骤:步骤1,在实时荧光定量PCR反应中,采集荧光信号数据集,所述数据集包含多个数据点;将每个所述数据点与设定的顺序号一一对应,使得每一个数据点分别对应平面坐标系中的一个坐标点(x,y),其中,x值表示实时荧光PCR循环数,y值表示测得的荧光信号值,所述荧光信号值包含发光值、吸光度;步骤2,通过使用数据拟合方法应用于函数模型,计算求出函数模型中的参数值a,b,c,d,e,得到函数表达式如下: ;所述数据拟合步骤为:步骤2.1,设置初始值:a选取所述数据集中的第一个y值;b选取1;c选取数据集中x值的均值;d选取数据集中最后一个y值;e选取1;步骤2.2,采用Levenberg-Marquardt法设置搜索方向;步骤2.3,终止条件为迭代的次数以及误差和的限值;步骤3,对所述函数表达式进行处理,求出荧光信号值达到指数扩增时的循环周期数Ct值。

全文数据:

权利要求:

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