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申请/专利权人：臻萃(江苏)酶科技发展有限公司

摘要：本发明提出了一种用于过氧化氢和肌氨酸快速定量检测的水凝胶试剂盒及其制备方法和应用，属于化学检测技术领域。将钴氮氯掺杂纳米酶，3,3',5,5'‑四甲基联苯胺，水凝胶，醋酸‑醋酸钠缓冲液加入去离子水中，加热搅拌混合均匀，冷却凝固后制得用于过氧化氢和肌氨酸快速定量检测的水凝胶试剂盒。本发明为食品样品中过氧化氢、生物样品中肌氨酸的检测提供了新的思路，也为临床上对前列腺癌之外的其他疾病生物标志物进行分析检测奠定了基础。

主权项：1.一种用于过氧化氢或肌氨酸快速定量检测的水凝胶试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的制备方法包括以下步骤：将钴氮氯掺杂纳米酶，3,3',5,5'-四甲基联苯胺，水凝胶，醋酸-醋酸钠缓冲液加入去离子水中，加热搅拌混合均匀，冷却凝固后制得水凝胶试剂盒；所述钴氮氯掺杂纳米酶由以下方法制备而成：将氯化胆碱、脯氨酸、钴盐混合加热搅拌至形成均一透明溶液，待冷却至室温后，加入去离子水中超声使其完全溶解，然后将混合物移入高压反应釜中加热反应完全，冷却至室温后，离心，过滤，将所得溶液冷冻干燥得到钴氮氯掺杂纳米酶；所述氯化胆碱、脯氨酸、钴盐的摩尔比为0.5-1.5：0.5-1.5：0.5-1.5，所述加热搅拌的温度为45-55℃，所述超声的功率为1000-1200W，超声的时间为5-15min，所述加热反应的温度为170-190℃，时间为5-7h，所述离心的转速为5000-7000rmin，时间为10-20min，所述过滤用的滤膜为0.22µm微孔滤膜；所述钴盐选自氯化钴、硫酸钴、硝酸钴中的至少一种；所述水凝胶为改性水凝胶；所述改性水凝胶的制备方法步骤如下：T1.羧基醛基化壳聚糖的制备：将壳聚糖溶于酸液中，加入α-酮戊二酸，加热搅拌反应，然后加入硼氢化钠，继续反应，加入乙醇沉淀，离心，固体溶于酸液中，加入高碘酸钠，避光搅拌反应，加入乙醇沉淀，离心，洗涤，干燥，制得羧基醛基化壳聚糖；T2.改性壳聚糖的制备：将步骤T1制得的羧基醛基化壳聚糖、1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶于水中，混合均匀，加入催化剂，加热搅拌反应，加入乙醇沉淀，离心，洗涤，干燥，制得改性壳聚糖；T3.单宁酸改性聚乙烯醇：将聚乙烯醇溶于水中，加入单宁酸和催化剂，室温搅拌反应，透析，透析液干燥，获得单宁酸改性聚乙烯醇；T4.改性水凝胶的制备：将步骤T2制得的改性壳聚糖、步骤T3制得的单宁酸改性聚乙烯醇和水混合均匀，加入醋酸调节pH值为3.5-4.5，得到凝胶，反复冻融，干燥，粉碎，得到干燥的改性水凝胶；所述催化剂均为pH=8.5-9的Tris-HCl溶液。

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