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一种多花黄精的遗传转化方法及应用 

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申请/专利权人:安徽农业大学

摘要:本发明提供了一种多花黄精的遗传转化方法及应用,涉及遗传转化技术领域。本发明以毛状根为媒介的高效遗传转化体系,利用含有工程菌菌液侵染多花黄精外植体,获得了转基因毛状根,侵染过程简单易学,结果高效直观,能够稳定获得多花黄精转基因毛状根。利用本发明所述遗传转化方法,在最优条件下可将诱导率提高至88.8%,可应用于多花黄精的基因功能验证。

主权项:1.一种多花黄精的遗传转化方法,其特征在于,包括以下步骤:将目标基因转化至发根农杆菌LBA9402中,利用12MS液体培养基+乙酰丁香酮进行重悬,得侵染液;所述12MS液体培养基中乙酰丁香酮的浓度为50~150μmolL;以多花黄精的小球茎为外植体,对所述外植体进行表面划伤和深层戳伤,而后置于所述侵染液中进行侵染;所述侵染的时间为2h;侵染结束后,吸取表面菌液,接种至12MS固体培养基+乙酰丁香酮中进行共培养,将在共培养过程中形成的含菌斑的外植体进行除菌培养;所述共培养为在25~28℃条件下暗培养,所述共培养的时间为2d;将除菌培养后诱导出来的毛状根剪下,经筛选后得到转基因毛状根。

全文数据:

权利要求:

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