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申请/专利权人：湖南宏雅基因技术有限公司

摘要：本发明提供了一种用于检测宫颈良恶性病变基因甲基化的引物对、试剂盒及其应用，涉及宫颈良恶性病变检测技术领域；包括分别选自PAX1基因和ZIK1基因的组合、GYPC基因和ZIK1基因的组合或者是PAX1基因、GYPC基因和ZIK1基因的组合中的任一一对生物标志物作为甲基化标志物对应的引物序列。通过对PAX1基因、GYPC基因和ZIK1基因的启动子区进行CpG岛分析，以不同CpG岛的相关区域作为靶基因进行引物探针设计，优化扩增条件，得到一种互相联合的可用于宫颈癌甲基化检测的引物对，以解决现有技术中因针对CpG位点的不同设计的引物探针导致最终检测的灵敏度和特异度存在差异的技术问题。

主权项：1.一种用于检测宫颈良恶性病变基因甲基化的引物对，其特征在于，包括至少以下任一一对生物标志物作为甲基化标志物对应的引物序列，所述甲基化标志物由PAX1基因和ZIK1基因中的一个靶区域内甲基化的核苷酸序列组成，或者是，所述甲基化标志物由GYPC基因和ZIK1基因中的一个靶区域内甲基化的核苷酸序列组成，或者是，所述甲基化标志物由PAX1基因、GYPC基因和ZIK1基因中的一个靶区域内甲基化的核苷酸序列组成；所述引物序列具体表示如下：PAX1基因的正向引物：5’-GTATTTCGCGTTCGACGAAGTTA-3’，或者是，5’-GTGCGAGATTTTATCGTTAGGG-3’，或者是，5’-TAGAGGGGTGGGTTTCGGG-3’；PAX1基因的反向引物：5’-ACACGCCTAAACCAAAAATTCCG-3’，或者是，5’-AAAAATCCCGATCTACTAC-3’，或者是，5’-ATTAATTCCCGTCACTACGC-3’；GYPC基因的正向引物：5’-CGTCGAGGGTTAGGAGTTCGGG-3’，或者是，5’-AGTTACGGTTACGGACGTTTTG-3’，或者是，5’-TCGATCGGTTAGGTTTCGGTG-3’；GYPC基因的反向引物：5’-TAACTACTACGAACCGCGACCT-3’，或者是，5’-ACGAACTAACGACTTCTCCAATC-3’，或者是，5’-ACGAAAAATTACAAACCCC-3’；ZIK1基因的正向引物：5’-AGTCGCGACGGGATTATAGA-3’，或者是，5’-GTTGAGTTAATTCGCGTTGA-3’，或者是，5’-AGTGGCGGTTATTTTTGTAGCG-3’；ZIK1基因的反向引物：5’-ATACTACCGCCCAACGTCACC-3’，或者是，5’-ACTATCGCCAAACAAAACGC-3’，或者是，5’-CCGCCGACCCTTAAAACC-3’。

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