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申请/专利权人:宁波检验检疫科学技术研究院(宁波国检贸易便利化服务中心);宁波海关技术中心;宁波中盛产品检测有限公司
摘要:本发明公开一种使用BSA模拟病毒的电化学检测方法,包括以下步骤:S1、构建玻碳电极表面粘接有多孔修饰层电化学免疫检测传感器,所述多孔修饰层包括电化学原位聚合的聚多巴胺和聚吡咯以及通过π‑π键吸附并包围的具有多孔结构的石墨烯气凝胶;在多孔修饰层表面固定有固定剂量的抗体;S2、获得工作电极的电荷转移电阻‑抗原浓度线性方程;S3、将含有待检测抗原的溶液滴加在玻碳电极的多孔修饰层,根据S2所得线性方程计算待检测抗原浓度;本发明通过使用导电聚合物将具有多孔且表面丰富的氧化石墨烯气凝胶作为电化学检测的界面,有效提升抗体固定的稳定性,生物相容性好,通过电极表面阻抗值变化快速获得抗原浓度,提升检测的灵敏度和精确度。
主权项:1.一种使用BSA模拟病毒的电化学检测方法,其特征在于:包括以下步骤:S1、构建电化学免疫检测传感器,所述电化学免疫检测传感器具有粘接在玻碳电极表面的多孔修饰层,所述多孔修饰层包括电化学原位聚合在玻碳电极表面的吡咯和多巴胺,聚合后的聚多巴胺和聚吡咯通过π-π键吸附并包围具有多孔结构的石墨烯气凝胶;聚吡咯-聚多巴胺-石墨烯气凝胶多孔修饰层的制备方法包括以下步骤:A1、将吡咯和聚多巴胺分散均匀分散于去离水中;调节电解液的pH值为6.2至6.8;通入氮气去除电解液中的氧气;A2、电化学聚合;将经过研磨清洁的表面涂覆并附着有粉碎的石墨烯气凝胶颗粒层的玻碳电极置于A1所得液相中静置,吡咯和多巴胺在氧化石墨烯气凝胶的吸附作用下分布于氧化石墨烯气凝胶表面,进行电化学聚合;在电氧化聚合的过程中具有微孔结构的氧化石墨烯气凝胶作为电子的传递介质拓展了电化学聚合的反应界面,从而形成了聚吡咯-聚多巴胺围绕氧化石墨烯气凝胶并将其附着在玻碳电极表面;在多孔修饰层表面固定有固定剂量的抗体;S2、取S1制得的在多孔修饰层表面固定有抗体的玻碳电极作为工作电极,铂电极作为对电极,饱和甘汞电极作为参比电极组成三电极体系,将三电极体系置于电解液中保持平行,分别在多孔修饰层的表面滴加已知浓度的抗原蛋白质测试交流阻抗值,获得工作电极的电荷转移电阻-抗原浓度线性方程;S3、将含有待检测抗原的溶液滴加在玻碳电极的多孔修饰层,抗原与固定多孔修饰层表面的抗体形成沉淀复合物,阻碍玻碳电极表面电子的传递,获得增强的阻抗值,根据S2所得线性方程计算待检测抗原浓度。
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