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用于构建扩增子测序文库的引物组、试剂盒和方法 

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申请/专利权人:杭州瑞普基因科技有限公司

摘要:本发明公开了一种构建扩增子测序文库的方法,其包括:采用捕获延伸引物对包括目标序列的样本进行线性扩增;采用扩增引物对对线性扩增产物进行PCR扩增,得到扩增子测序文库;捕获延伸引物的5’端到3’端依次包括第一靶向序列、UMI序列和单向引物,第一靶向序列包括Read1测序引物序列或Read2测序引物序列,单向引物用于扩增目标序列,捕获延伸引物用于对目标序列进行线性扩增。该方法可通过捕获延伸引物基于原始模板进行线性扩增,提高了原始模板的利用率;并且,捕获延伸引物中含有UMI序列,且合成链信息直接来源于原始模板,避免了多次扩增时带来的错配积累。由此得到扩增子测序文库能够实现超低频突变的高灵敏检测。

主权项:1.引物组,其特征在于,包括:捕获延伸引物,所述捕获延伸引物的5’端到3’端依次包括第一靶向序列、UMI序列和单向引物,所述第一靶向序列包括Read1测序引物序列或Read2测序引物序列,所述单向引物用于扩增目标序列,所述捕获延伸引物用于对目标序列进行线性扩增;扩增引物对,所述扩增引物对用于对线性扩增产物进行PCR扩增。

全文数据:

权利要求:

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