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血管内皮祖细胞小分子代谢产物的培养提取方法及用途 

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申请/专利权人:重庆市铂而斐细胞生物技术有限公司

摘要:血管内皮祖细胞小分子代谢产物的培养提取方法及用途,所属生物技术领域,方法采用正常培养基培养制备血管内皮祖细胞,之后采用提取培养基进行血管内皮祖细胞分泌物的提取,提取培养基的活性成分为马钱子提取物和倒扣草提取物,两类提取物在被血管内皮祖细胞吸收代谢后,产生代谢产物,经3kDa的超滤膜压滤后,获得小分子代谢产物,该代谢产物能够抑制Flt1酪氨酸激酶受体的活性,进而一定程度上阻断血管内皮生长因子VEGF的效用,降低血管内皮通透性;对Flt1酪氨酸激酶受体的抑制率达到84%以上。

主权项:1.一种血管内皮祖细胞小分子代谢产物的培养提取方法,其特征在于,方法包括如下步骤:S1:取扩增后的P2代CD34+单个核细胞,置于包被有纤维连接蛋白的培养板中,采用内皮祖细胞培养基进行培养,CD34+单个核细胞在内皮祖细胞培养基中初始密度为3.5×106个细胞mL~5×106个细胞mL;培养2天~4天后,全量换液去除非贴壁细胞,选择贴壁细胞继续培养,每2天~3天更换1次内皮祖细胞培养基,更换2次~3次后,培养1天~2天,换成提取培养基,继续培养,每2天更换1次提取培养基,收集保留参与培养后的提取培养基,更换2次~4次后,收集合并全部参与培养后的提取培养基,计为:代谢液A;所述提取培养基的成分为,纯化水添加300ngmL~600ngmL马钱子提取物、100ngmL~200ngmL倒扣草提取物;S2:将代谢液A,采用3kDa的超滤膜压滤,取小于3kDa的滤液,浓缩、干燥,得到血管内皮祖细胞小分子代谢产物。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 重庆市铂而斐细胞生物技术有限公司 血管内皮祖细胞小分子代谢产物的培养提取方法及用途

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