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用于骨质疏松外泌体miRNAs检测的电化学发光生物传感器及其制备与应用 

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申请/专利权人:重庆市人民医院

摘要:本发明属于医药技术领域,具体公开了一种用于骨质疏松外泌体miRNAs检测的电化学发光生物传感器及其制备与应用。所述电化学发光生物传感器基于三维磁性步行纳米机器和DNA四面体功能化的AuNPs@g‑C3N4纳米材料构建而成。本发明利用高效的作为信号转换和放大的3DDNA步行器和优越的自发光AuNPs@g‑C3N4纳米材料,实现了目标外泌体miRNA的超灵敏检测,为开发骨质疏松外泌体miRNAs的超灵敏检测系统展示了一个可靠且很有前景的策略,并为骨质疏松症的早期临床诊断提供了一个很有前途的工具。

主权项:1.一种用于骨质疏松外泌体miRNAs检测的电化学发光生物传感器,其特征在于,包括三维磁性步行纳米机器、AuNPs@g-C3N4纳米材料和DNA四面体、叶酸修饰的S4单链DNA和工作电极,所述三维磁性步行纳米机器包括链霉亲和素标记的磁珠,与所述磁珠相结合并作为步行链的生物素修饰的S1PP双链DNA,与所述磁珠相结合并作为DNA轨道的S2单链DNA,以及作为驱动力的限制性核酸内切酶;所述S1PP双链DNA由生物素修饰的S1单链DNA和保护探针PP杂交形成;所述保护探针PP用于通过立足点置换与目标外泌体miRNA杂交形成双链,释放出S1单链DNA;所述S1单链DNA能与所述S2单链DNA杂交形成酶切位点;所述限制性核酸内切酶用于特异性识别所述酶切位点并切割出短链S3,同时释放S1单链DNA;所述AuNPs@g-C3N4纳米材料用于沉积在所述工作电极上,以获得电化学发光响应信号并提供活性位点;所述DNA四面体能通过Au-S键与所述AuNPs@g-C3N4纳米材料结合并固定在所述工作电极上,作为支架,构建“自下而上”的锚定生物探针;所述叶酸修饰的S4单链DNA用于与所述修饰电极上的DNA四面体杂交以淬灭电化学发光响应信号;所述短链S3用于取代所述叶酸修饰的S4单链DNA以恢复被猝灭的电化学发光响应信号。

全文数据:

权利要求:

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