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申请/专利权人:南京周子未来食品科技有限公司
摘要:本发明提供一种用于肌源性细胞体外增殖的化学成分明确的培养基,该培养基通过添加细胞培养补充因子,代替血清在肌源性细胞增殖过程中发挥的作用,来避免血清存在的一系列问题,使肌源性细胞在至少3代9天的传代过程中保持每代增殖3倍左右的增殖能力,且活细胞比例维持在90%左右。在分子水平上,本发明的化学成分明确的用于肌源性细胞体外增殖的培养基能够显著提高肌源性基因的表达,同时也显著提高细胞外基质蛋白基因的表达。此外免疫荧光结果显示,本发明的化学成分明确的用于肌源性细胞体外增殖的培养基在传代过程中维持肌源性蛋白、细胞外基质蛋白和细胞特异性蛋白表达的阳性细胞比例,维持细胞种群保持不变。
主权项:1.一种化学成分明确的用于肌源性细胞体外增殖的培养基,其特征在于,所述的用于肌源性细胞体外增殖的培养基包括细胞培养补充因子和细胞增殖培养基,其中不含血清成分;肌源性细胞为肌肉干细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞;所述细胞增殖培养基包括肌源性细胞基础培养基和青霉素-链霉素双抗溶液;所述细胞培养补充因子包括吐温80、花生四烯酸、胆固醇、维生素E醋酸酯、亚油酸、亚麻酸、十四酸、油酸、软脂酸、棕榈油酸、普兰尼克F68、十八酸、胰岛素、转铁蛋白、乙醇胺、亚硒酸钠、地塞米松、白蛋白、胰岛素样生长因子、表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子,所述细胞培养补充因子还包括白血病抑制因子、抗坏血酸、抗坏血酸磷酸三钠盐、Rock抑制剂、N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、皮质醇、水溶性维生素E、佛司可林、肝细胞生长因子、N-乙酰-L-半胱氨酸、油酰基溶血磷脂酸钠盐、非必需氨基酸补充剂中的一种或多种的组合;所述用于肌源性细胞体外增殖的培养基中,任一添加的细胞培养补充因子的浓度为1ngmL-10mgml。
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