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申请/专利权人:新疆农业科学院
摘要:本发明公开了一种互隔交链孢霉AltemariaaltemataXJ‑FQ72在产细交链孢菌酮酸中的应用,从新疆维吾尔自治区塔城地区乌苏市的加工番茄主产园区种的病害番茄中分离获得一株互隔交链孢霉AltemariaaltemataXJ‑FQ72,将该菌株经专用培养基发酵培养7d,接种发酵培养基获得互隔交链孢霉AltemariaaltemataXJ‑FQ72发酵物,发酵物经吸附层析分离获得高纯细交链孢菌酮酸TeA,产生TeA浓度可达382.31μgmL,TeA纯度为89.8%,该制备方法简单,发酵时间短,产率高,获得TeA毒素纯度高,本发明提供的方法有效解决了如何高产量、高纯度、低成本制备高纯度的TeA毒素标准品这一行业技术难题。
主权项:1.一种互隔交链孢霉AltemariaaltemataXJ-FQ72在产细交链孢菌酮酸中的应用,其特征在于,该方法具体包括如下步骤:1将-80℃甘油管中保藏的互隔交链孢霉AltemariaaltemataXJ-FQ72单菌落接种于专用培养基中,于27℃恒温培养7d,获得互隔交链孢霉AltemariaaltemataXJ-FQ72种子;2用直径6mm的无菌打孔器于菌落边缘打取菌饼,将菌饼按照质量比6-8%接种到含有发酵培养基的250mL三角瓶中,于24-28℃,130-160rmin发酵培养7d;3离心后收集发酵液,加入60mL含0.25%1M盐酸的酸性乙酸乙酯,涡旋后离心,收集上清液,利用旋转蒸发仪加压蒸馏至干燥,得到粗提物;4将步骤3所得粗提物用2mL甲醇溶解,采用薄层层析硅胶柱分离,硅胶柱的型号为SephadexLH-20,用体积比为10:3:5的己烷,丙酮和甲醇的混合液洗脱后得到17个馏分,柱层析流速为1滴秒,收集14~26min的馏分,合并后浓缩,获得细交链孢菌酮酸。
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