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申请/专利权人：山西大学
摘要：本发明提供一种藜麦miRNAs提取物的制备方法及其在抗肿瘤相关医药产品中的应用，属于生物医药领域。藜麦miRNAs提取物的制备方法为：将纯天然藜麦研磨成粉末，加入超纯水，沸水浴一段时间后，获得藜麦浓缩液；将该浓缩液按照植物miRNA试剂盒的提取方法进行制备，获得藜麦miRNAs提取物，命名为：cqu‑miRNAs。通过体外肿瘤细胞模型，发现：藜麦源cqu‑miRNAs能够显著抑制结肠癌细胞增殖，诱导结肠癌细胞凋亡；采用裸鼠异体移植瘤模型，进一步证实cqu‑miRNAs在动物体内也能显著抑制结肠癌肿瘤的生长。本发明为藜麦cqu‑miRNAs能够跨界发挥抗肿瘤活性提供实验依据，同时也为植物miRNAs在核酸药物方面的研发应用奠定理论基础。
主权项：1.一种具有抗肿瘤活性的藜麦miRNAs提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步：将纯天然藜麦研磨成粉末，按一定的比例加入适量的超纯水，沸水浴孵育30-50min，浓缩到一定体积，获得藜麦浓缩液；第二步：将上述藜麦浓缩液按照M5PlantmicroRNAExtractionKit试剂盒的提取方法，制备得到藜麦miRNAs提取物，命名为：cqu-miRNAs；具体制备步骤如下：取上述藜麦浓缩液置于离心管中，按比例加入一定量的CLB裂解液，吹打混匀，于65℃水浴孵育10-15min，期间颠倒2-3次充分裂解，13,000rpm离心10min；取上清置于DNA清除柱中，13,000rpm离心60S，收集滤液；加入1.25倍体积的无水乙醇，吹打混匀，转移到RNA吸附柱中，13,000rpm离心30S，弃掉废液；在吸附柱中依次加入WashSolution1、WashSolution23溶液进行洗涤，弃掉废液；将RNA吸附柱放回收集管中，13,000rpm离心2min，再将吸附柱放入RNasefree离心管中，室温放置2min，加入60μLRNasefreewater洗脱，室温放置1min，12,000rpm离心1min，重复此步骤，获得藜麦mRNAs提取物，命名为：cqu-miRNAs，于-80℃保存备用。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 山西大学 一种藜麦miRNAs提取物及其制备方法和应用
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