买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：合肥工业大学

摘要：本发明公开了一种原位激活产脲酶微生物加固土体优化方法，属于微生物矿化技术领域。该优化方法包括以下步骤：刺激方案调配；碳源调配；辅助氮源调配；筛选测试；关键筛选和浓度试验。该优化方法，通过先设置初始培养方案再通过单因素试验筛选出比较适合的最佳碳源和最佳辅助氮源，随后利用Plackett‑Burman实验设计进一步找出其中几种显著影响因子，并找出各种因子的合理范围，最后根据CCD中心组合方案对整个刺激培养方案进行优化，提高生物刺激的效果，为生物矿化提供良好的先前条件，进而实现有效针对不同土体的生物刺激方案的设计。

主权项：1.一种原位激活产脲酶微生物加固土体优化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，初始刺激物的调配所述初始刺激物由乙酸钠、氯化铵、尿素、酵母抽提物YE、0.01mM氯化镍溶液和蒸馏水混合调配而成，其中，乙酸钠、氯化铵、尿素、酵母抽提物YE、0.01mM氯化镍溶液的质量占蒸馏水质量的百分比分别如下：乙酸钠：2％；氯化铵：0.5％；尿素：2％；酵母抽提物YE：0.1％；0.01mM氯化镍溶液按：0.1％；调配完成后，初始刺激物的pH为7.0；步骤2，碳源调配首先选取果糖、糖蜜、葡萄糖、麦芽糖、淀粉、甘蔗渣作为碳源，然后分别取代步骤1中的乙酸钠进行制备，得到六组碳源制备物；对上述六组碳源制备物和一份步骤1得到的初始刺激物进行灭菌，并在灭菌后再分别加入风干土样，该风干土样的质量为步骤1所述蒸馏水质量的5％，混合均匀后，得到七组碳源对比例；步骤3，辅助氮源调配选取蛋白胨、玉米浆、黄豆饼粉、硫酸铵和硝酸铵作为辅助氮源，分别取代步骤1中的氯化铵进行制备，得到五组辅助氮源制备物；对上述五组辅助氮源制备物和一份步骤1得到的初始刺激物进行灭菌，并在灭菌后再分别加入风干土样，该风干土样的质量为步骤1所述蒸馏水质量的5％，混合均匀后，得到六组辅助氮源对比例；步骤4，单因素筛选将七组碳源对比例和六组辅助氮源对比例分别置于恒温振荡培养箱中进行振荡培养，其中，温度设定为20℃-40℃，转速设定为150rpm-200rpm，培养时间设定大于96h；然后分别测量培养后的十三组对比例的电导率值和脲酶活性，选取脲酶活性最高和次高的碳源对比例中的碳源作为最佳碳源，选取脲酶活性最高和次高的辅助氮源对比例中的辅助氮源作为最佳辅助氮源；步骤5，关键筛选使用Minitab16软件设计Plackett-Burman实验方案，将步骤4得到的两个最佳碳源和两个最佳辅助氮源、步骤1中的尿素、酵母抽提物YE和0.01mM氯化镍溶液作为研究因素进行摇瓶实验，然后使用Minitab16软件对摇瓶实验结果进行回归分析和方差分析，并以脲酶活性为评价指标生成Plackett-Burman实验结果的帕累托图，从最佳辅助氮源中选取得到最终辅助氮源，从最佳碳源中选取得到最终碳源，最后从最终辅助氮源、最终碳源、尿素、酵母抽提物YE和0.01mm氯化镍溶液中选出关键因子；步骤6，浓度试验用Minitab16软件进行CCD试验方案设计和分析，具体的，将最终辅助氮源、最终碳源和尿素的浓度作为CCD中心组合设计的关键因子，以脲酶活性作为响应目标值，以最终辅助氮源、最终碳源和尿素的浓度作为自变量，进行CCD试验，得到最终辅助氮源、最终碳源和尿素的最佳浓度，并生成优化后的刺激方案。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 合肥工业大学 一种原位激活产脲酶微生物加固土体优化方法