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申请/专利权人：云南林业职业技术学院;云南植虫药生物科技有限公司

摘要：本发明涉及植物组培技术领域，具体来说是一种北美红杉组培快繁方法及应用；步骤包括：外植体消毒：选择端部未木质化的幼嫩枝条，利用酒精、双氧水、升汞消毒；初代丛生芽诱导：消毒外植体接种于初代丛生芽诱导培养基中培养；继代丛生芽增殖：初代诱导丛生芽切成单芽，接种于丛生芽增殖培养基培养；丛生芽生根：继代丛生芽切成单芽，接种于生根培养基培养；本发明在无菌体系建立过程中，较现有技术消毒效果佳，主要表现为在对损伤外植体极小损伤的前提下，有效降低了污染率，其主要是通过采用常规的酒精和升汞的同时，在中间环节添加一定浓度的双氧水进行消毒，同时配合降低升汞浓度以及采用适宜的升汞消毒时间的方式。

主权项：1.北美红杉组培快繁方法，其特征是，步骤包括：（1）外植体消毒：选择端部未木质化的幼嫩枝条，利用75%酒精消毒50～60s，无菌水涮洗2～3次；利用0.2%双氧水在60rmin常温摇床上消毒4～6h，无菌水涮洗2～3次；利用0.05%升汞消毒12～15min，无菌水涮洗6～7次；（2）初代丛生芽诱导：消毒的外植体接种于初代丛生芽诱导培养基中，置于温度25±2℃，每日照光12h，光强2000～3000lx的光暗交替下培养40～45天；所述初代丛生芽诱导培养基配方为：WPM+NAA0.1～0.2mgL+ZT2.0～3.0mgL+TDZ0.5～1.0mgL+活性炭0.3～0.5gL；（3）继代丛生芽增殖：初代诱导丛生芽切成单芽，接种于丛生芽增殖培养基中，置于温度25±2℃，每日照光12h，光强2000～3000lx的光暗交替下培养30～35天；所述继代丛生芽增殖培养基配方为：WPM+NAA0.02～0.05mgL+ZT0.5～1.0mgL+TDZ0.3～0.5mgL+BR0.02～0.03mgL+椰汁20～30mlL；（4）丛生芽生根：继代丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中，置于温度25±2℃，每日照光14h，光强2000～3000lx的光暗交替下培养20～25天；所述生根培养基配方为：12WPM+NAA0.2～0.3mgL+IBA1.0～1.2mgL+椰汁50～60mlL。

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