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申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所
摘要:本发明提供了一种基于SplitGFP的多层次细胞表面展示评估方法,1)将GFP10或GFP10‑11片段与锚定蛋白和乘客蛋白融合,诱导表达后加入GFP1‑10或GFP1‑9孵育,用荧光显微镜快速定性评价是否成功表面展示;2)通过酶标仪测定孵育后细胞的荧光强度,建立体外SplitGFP自组装复合物的荧光强度与GFP11或GFP10‑11浓度的标准曲线,定量评估表观目的蛋白展示数量;3)用过流式细胞技术测定成功表面展示的细胞比例,并定量评估成功表面展示细胞表面目的蛋白的展示数量。本发明具有操作简便,成本低廉,对目的蛋白的结构和功能影响小,评估全面、准确,适用性广等优点,可以有效促进新型表面展示系统的开发和应用,具有重要应用价值。
主权项:1.一种基于SplitGFP定量评估微生物表面展示效率的方法,其特征在于,将锚定蛋白、目标蛋白和splitGFP小肽片段融合表达的表面展示微生物,与splitGFP小肽互补片段孵育,通过检测SplitGFP片段自组装后的荧光强度定量评估微生物表面展示目标蛋白的效率。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种基于Split GFP定量评估微生物细胞表面展示效率的方法
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