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一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法 

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申请/专利权人:四川大学华西医院

摘要:本发明公开了一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法,该方法的核心发明点是在多聚甲醛固定前先常温干燥6~12小时。本发明改进方法在NETs的验证实验中,能帮助排除因多聚甲醛固定导致的假阳性,且能明显减少实验过程中细胞被洗掉的风险,有利于中性粒细胞的NETs的相关实验的开展。

主权项:1.一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤S1、提取中性粒细胞,并调整中性粒细胞浓度;步骤S2、将中性粒细胞加入细胞培养板内,给予或不给予中性粒细胞NETs刺激剂,37℃细胞培养箱孵育;步骤S3、收集细胞进行甩片机离心;步骤S4、甩完片后,取出甩完片的细胞黏附片子;步骤S5、常温干燥6~12h后,多聚甲醛常温固定,Triton透化,BSA常温封闭,T-PBS洗涤;孵育一抗,T-PBS洗涤,常温孵育二抗,DAPI染核封片荧光镜下观察。

全文数据:

权利要求:

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