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申请/专利权人:中国计量大学
摘要:本发明公开了一种扶桑绵粉蚧的杀雄基因的培养方法及其应用,具体包括以下步骤:对PsEZH2和PsEHMT1基因全长和dsRNA的扩增;表达载体构建;遗传转化和试虫饲养,本发明首次扩增获得了扶桑绵粉蚧PsEZH2和PsEHMT1基因,获得了可分别成功抑制他们的dsRNA,本发明基于PsEZH2和PsEHMT1基因,分别首次构建了可表达dsPsEZH2和dsPsEHMT1的两种转基因烟草,扶桑绵粉蚧雌成虫取食这两种转基因烟草后,体内雄性胚胎数量显著减少,所产后代中雄性后代及其比例显著下降。
主权项:1.一种扶桑绵粉蚧的杀雄基因的培养方法及其应用,其特征在于,具体包括以下步骤:S1:PsEZH2和PsEHMT1基因全长和dsRNA的扩增;S2:DS2300的植物表达载体,使用KpnI和BamHI双酶切dsRNA片段和DS2300质粒,分别将dsPsEZH2和dsPsEHMT1的正链连接至DS2300载体,形成DS2300-sPsEZH2和DS2300-sPsEHMT1重组质粒;S3:使用SacI和SmaI双酶切dsRNA片段、DS2300-sPsEZH2和DS2300-sPsEHMT1,将dsPsEZH2和dsPsEHMT1的负链分别连接至DS2300-sPsEZH2和DS2300-sPsEHMT1载体,最终获得DS2300-dsPsEZH2和DS2300-dsPsEHMT1两个表达载体;S4:通过农杆菌介导的转化将上述重组载体转入烟草,筛选获得阳性转基因植株供试;S5:利用S4中的烟草对扶桑绵粉蚧初羽雌成虫继代饲养。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国计量大学 一种扶桑绵粉蚧的杀雄基因的培养方法及其应用
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