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一种用于分型鉴定中非型和西非型猴痘病毒的双重qPCR检测试剂盒 

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申请/专利权人:三亚南京农业大学研究院;南京农业大学

摘要:本发明提供了一种用于分型鉴定中非型和西非型猴痘病毒的双重qPCR检测试剂盒,所述试剂盒包含热启动TaqDNA聚合酶、无酶水、PCR反应液和探针法荧光定量PCR配套Buffer,以及针对中非基因型和西非基因型猴痘病毒的两组特异性引物、TaqMan探针和阳性对照品。本试剂盒实现了在一个PCR反应管中分型鉴别检测猴痘病毒的两种基因型毒株,西非基因型和中非基因型猴痘病毒的阳性样品检测最低浓度为100拷贝μL和5拷贝μL,并具有广泛的适用性、极佳的特异性和重复性,可直接应用于猴痘病毒实验室检测,为猴痘病毒的流行病学研究提供快速、准确的检测方法。

主权项:1.用于分型鉴别中非型和或西非型猴痘病毒的引物探针组合物,其特征在于,所述引物探针组合物包括用于检测中非基因型猴痘病毒的引物对A及TaqMan探针序列、用于检测西非基因型猴痘病毒的引物对B及TaqMan探针序列;所述用于检测中非基因型猴痘病毒的引物对A及TaqMan探针序列,引物对A由MPXV-CAF和MPXV-CAR组成,所述引物对A及TaqMan探针的核苷酸序列如下:MPXV-CAF:5’-ACATTGTAGTTGTATGAGWGTATG-3’,如SEQIDNo:1所示;MPXV-CAR:5’-CGTGTCAGATTGTTAAATGTCC-3’,如SEQIDNo:2所示;MPXV-CA-Probe:5’-FAM-GCCGCTAGAAGTTTTCCGTTTGATATA-MGB-3’,如SEQIDNo:3所示;用于检测西非基因型猴痘病毒的引物对B及TaqMan探针序列,引物对B由MPXV-WAF和MPXV-WAR组成,所述引物对B及TaqMan探针的核苷酸序列如下:MPXV-WAF:5’-TTTTGTCAGATTCACGCTCT-3’,如SEQIDNo:4所示MPXV-WAR:5’-AATCAGAACTCTATTCGGCAT-3’,如SEQIDNo:5所示MPXV-WA-Probe:5’-VIC-TTGTTCCCTGGCATTACCGAG-BHQ1-3’,如SEQIDNo:6所示;优选的,所述MPXV-CA-Probe的部分碱基被锁核酸修饰,具体如下:MPXV-CA-Probe:5’-FAM-GaCCGCTAGAAGaTaTTaTCCGTTTGATATAa-MGB-3’,其中, a:表示LockedNucleicAcid,该碱基被锁核酸修饰。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 三亚南京农业大学研究院 南京农业大学 一种用于分型鉴定中非型和西非型猴痘病毒的双重qPCR检测试剂盒

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