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一种G11-scFv-Nluc双功能活性的融合蛋白及其应用 

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申请/专利权人:广东工业大学

摘要:本发明公开了一种G11‑scFv‑Nluc双功能活性的融合蛋白及其应用,旨在提供一种具有较好特异性和信号放大作用融合蛋白,采用该融合蛋白建立超敏的生物发光免疫分析试剂盒,用于检测尿液中甘胆酸的含量,具有良好的应用价值及前景;所述的G11‑scFv‑Nluc融合蛋白通过下述方法制备的:以纳米荧光素酶作为生物发光的催化剂,将抗甘胆酸单链抗体G11‑scFv与纳米荧光素酶融合并克隆到pET22b表达载体中,获得的属于免疫检测技术领域。

主权项:1.一种G11-scFv-Nluc双功能活性的融合蛋白,其特征在于,所述的G11-scFv-Nluc融合蛋白通过下述方法制备的:以纳米荧光素酶Nluc作为生物发光的催化剂,将G11-scFv与纳米荧光素酶融合并克隆到pET22b表达载体中,获得的;具体为:分别以SNF1,SNR1以及SNF2,SNR2为引物分别克隆G11-scFv以及Nluc基因;所述的SNF1引物的DNA序列为:CCGAATTCGGTGGCCCAGGCGGCCCTGACTCAG;所述的SNR1引物的DNA序列为:ACCGCCGCTGCCGCCACCACCCTGGCCGGCCTGG;所述的SNF2引物的DNA序列为:GGTGGTGGCAGCGGCGGTATGGTCTTCACACTCGAA;所述的SNR2的引物DNA序列为:CCGCTCGAGCGCCAGAATGCGTTCGCA;分别以第一轮产物G11-scFv以及Nluc基因为模板,以SNF1,SNR2为引物进行重叠延伸PCR技术获得G11-scFv-Nluc;所述的G11-scFv基因序列如SEQIDNO.1所示;Nluc基因序列如SEQIDNO.2所示。

全文数据:

权利要求:

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