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一种体外合成群体感应信号分子AI-2的方法 

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申请/专利权人:河南师范大学

摘要:本发明公开了一种体外合成群体感应信号分子AI‑2的方法,属于群体感应信号分子的合成技术领域。根据奇球菌Y35基因组中AI‑2合成关键基因pfs和luxS设计引物,以菌株Y35基因组DNA为模板对基因pfs和luxS进行扩增,扩增产物经过酶切纯化后与酶切后的质粒pET28a连接,构建重组质粒pET28a‑pfs和pET28a‑luxS,并在表达菌株E.coliBL21DE3进行异源表达,进一步对诱导条件进行响应面优化,提高蛋白的产量,降低AI‑2体外合成的成本,并对AI‑2的产量进行测定。本方法能够提高AI‑2的产量,为群体感应信号分子AI‑2的合成以及后续相关研究奠定了基础。

主权项:1.一种体外合成群体感应信号分子AI-2的方法,其特征在于:以奇球菌Y35基因组DNA为模板分别扩增S-腺苷同型半胱氨酸核苷酶合成基因pfs和S-核糖同型半胱氨酸酶合成基因luxS,并进行异源表达;经过诱导条件优化和蛋白纯化后,分别获得纯化的Pfs蛋白和LuxS蛋白,同时与S-腺苷同型半胱氨酸在磷酸钠缓冲液中进行反应,从而实现体外合成AI-2,其中Pfs蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示,LuxS蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。

全文数据:

权利要求:

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