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申请/专利权人:首都医科大学附属北京朝阳医院
摘要:本发明涉及生物技术技术领域,尤其是涉及一种Kcnj11点突变的Hela细胞模型及其构建方法和应用,其中,构建方法包括以下步骤:针对Kcnj11基因需要突变的目的基因位点,设计gRNA靶点;根据gRNA靶点合成插入片段,并构建敲除质粒;将敲除质粒转染至Hela细胞,并同时加入donor质粒,得到Kcnj11基因突变的Hela细胞模型。经活性检测及测序鉴定得到的Kcnj11点突变的Hela细胞模型,为一稳定可靠的模型,可用于由Kcnj11点突变所致的单基因糖尿病的诊断和精确分型,进而实现个体化治疗,给予患者最优化治疗方案的基础,对于疾病进程、预后的判断及对家族遗传指导具有重要的意义。
主权项:1.一种Kcnj11点突变的Hela细胞模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、针对Kcnj11基因需要突变的目的基因位点,设计gRNA靶点;S2、根据gRNA靶点合成插入片段,并构建敲除质粒;S3、将敲除质粒转染至Hela细胞,并同时加入donor质粒,得到Kcnj11基因突变的Hela细胞模型;其中,所述gRNA靶点的序列如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2或SEQIDNo.3所示;所述donor的序列如SEQIDNo.4所示。
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百度查询: 首都医科大学附属北京朝阳医院 Kcnj11点突变的细胞模型及其构建方法和应用
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