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一种辽宁绒山羊毛囊毛乳头细胞分离培养方法 

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申请/专利权人:沈阳农业大学

摘要:本发明公开了一种绒山羊毛囊毛乳头细胞分离培养的方法,属于生物学技术领域。本发明的实验方法包括:1取绒山羊颈背部皮肤,显微镜下分离初级毛囊和次级毛囊,分别置于0.2%Ⅱ型胶原酶中消化一段时间;2分离获得初级毛囊毛乳头和次级毛囊毛球部;3将初级毛囊毛乳头和次级毛囊毛球部固定于培养皿中,加入培养液进行培养;4剔除次级毛囊毛乳头细胞培养过程中的毛母质细胞,用胰蛋白酶于37℃消化4分钟,收集毛乳头细胞。该发明相比于现有技术显著提高了细胞的贴壁率,并确保了高纯度的毛乳头细胞,为类似较小的毛囊毛乳头细胞的高效分离培养方法提供参考。

主权项:1.一种绒山羊毛囊毛乳头细胞的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:1将采集的绒山羊颈背部皮肤冲洗干净,然后进行消毒处理,于显微镜下分离初级毛囊和次级毛囊;2将步骤1所得的初级毛囊和次级毛囊分别置于浓度为0.1~1.0%的Ⅱ型胶原酶中消化处理10~15分钟,然后终止消化;3于显微镜下切下初级毛囊毛球部,并将毛乳头分离出来;于显微镜下切下次级毛囊毛球部;4将步骤3中所得到的初级毛囊毛乳头以及次级毛囊毛球部固定于培养皿中,加入含10%胎牛血清的DMEM培养液进行培养;5在次级毛囊毛乳头细胞培养过程中,剔除混杂的毛母质细胞,然后用含EDTA的0.1~0.3%胰蛋白酶消化3~5分钟,收集毛乳头细胞。

全文数据:

权利要求:

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