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申请/专利权人：杭州医学院
摘要：本发明公开了通过构建问号钩端螺旋体LipL21、LipL32、groEL和loa22蛋白的优势T‑和B‑细胞T‑B联合多价抗原表位融合基因及其原核表达系统，表达由抗原表位组成的多抗原肽（multipleantigenicpeptide，MAP）与高分子核心载体人工交联制备MAP疫苗。本发明制备的MAP疫苗免疫效果好、成本较低，能有效诱导细胞免疫，减少了疫苗毒副作用，提高了安全性，增强了免疫针对性。
主权项：1.一种问号钩端螺旋体MAP疫苗的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）选择钩体4种蛋白的6个表位设计T-B联合多价抗原表位融合基因，经合成后插入pET-28a表达载体构建以E.coliBL21表达宿主菌的工程菌，IPTG诱导表达，纯化处理，得到多价抗原表位rLLGL蛋白；2）采用中空纤维超滤器收集Ni-NTA亲和层析法提纯后的T-B联合多价抗原表位rLLGL蛋白，碳二亚胺活泼酯法封闭T-B联合多价抗原表位氨基，然后通过其羧基与Poly-Asp-Lys交联，采用中空纤维超滤器收集T-B表位-Poly-Asp-Lys交联物；3）将步骤2）收集的T-B表位-Poly-Asp-Lys交联物与氢氧化铝佐剂混合后形成多抗原肽MAP疫苗。
全文数据：
权利要求：
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